技术文章
Technical articles这些微量加样器的吸液范围在1—1000~1之间,适用 于临床常规化学实验室使用。微量加样器发展到今天,不但加样更为精确,而且品种也多种多样,如微量分配器、多通道微量加样器等,其加样的物理学原理有下面两种:
①使用空气垫(又称活塞冲程)加样;
②使用无空气垫的活塞正移动(positive displacement)加样。
上述两种不同原理的微量加样器有其不同的特定应用范围。
一、空气垫加样器活塞冲程(空气垫)加样器可很方便地用于固定或可调体积液体的加样,加样体积的范围在小于1ul至l0ml之间。加样器中的空气垫的作用是将吸于塑料吸头内的液体样本与加样器内的活塞分隔开来,空气垫通过加样器活塞的弹簧样运动而移动,进而带动吸头中的液体,死体积和移液吸头中高度的增加决定了加样中这种空气垫的膨胀程度。
因此,活塞移动的体积必须比所希望吸取的体积要大约2%~4%,温度、气压和空气湿度的影响必须通过对空气垫加样器进行结构上的改良而降低,使得在正常情况下不至于影响加样的准确度。
一次性吸头是本加样系统的一个重要组成部分,其形状、材料特性及与加样器的吻合程度均对加样的准确度有很大的影响。
二、活塞正移动加样器以活塞正移动为原理的加样器和分配器与空气垫加样器所受物理因素的影响不同。
因此,在空气垫加样器难以应用的情况下,活塞正移动加样器可以应用,如具有高蒸汽压的、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm3的液体;又如在临床聚合酶链反应(PCR)测定中,为防止气溶胶的产生,最好使用活塞正移动加样器。
活塞正移动加样器的吸头与空气垫加样器吸头有所不同,其内含一个可与加样器的活塞耦合的活塞,这种吸头一般由生产活塞正移动加样器的厂家配套生产,不能使用通常的吸头或不同厂家的吸头。
三、多通道加样器、电子加样器和分配器多通道加样器、电子加样器和分配器的原理与上述相同。多通道加样器通常为8通道或12通道,与8X12=96孔微孔板一致。
多通道加样器的使用不但可减少实验操作人员的加样操作次数,而且可提高加样的精密度。电子加样器和分配器为半自动加样系统,电子加样器最大的优点是其具有很高的加样重复性,应用范围广。
第二部分:移液器的使用规范以及注意事项
1.使用合适的吸头:
为确保更好的准确性和精度,建议移液量在吸头的35%-100%量程范围内。
2.设定移液体积
从大量程调节至小量程为正常调节方法,逆时针旋转刻度即可
从小量程调节至大量程时,应先调至超过设定体积刻度,再回调至设定体积,这样可以保证移液器的精确度
3.吸头的安装:
对于大多数品牌的移液器,特别是多道移液器,安装吸头并非易事:为追求良好的密封性,将移液器垂直插入吸头,左右旋转半圈,上紧即可。也有人会用移液器反复撞击吸头来上紧,但这样操作会导致吸头变形而影响精度,严重的则会损坏移液器,所以应当避免出现这样的操作。有的多道移液器设有O型环,配合有前挡点的吸头,只需轻压一下即可达致理想密封。
4.吸头浸入角度和深度:
吸头浸入角度控制在倾斜20度之内,保持竖直为佳;吸头浸入深度建议如下所示:
5.吸头润洗:
对常温样品,吸头润洗有助于提高准确性;但是对于高温或低温样品,吸头润洗反而降低操作准确性,请使用者特别注意。
6.吸液速度:
移液操作应保持平顺、合适的吸液速度;过快的吸液速度容易造成样品进入套柄,带来活塞和密封圈的损伤以及样品的交叉污染。
7.移液器的放置
吸有液体的移液器不应平放,吸头内的液体很容易污染枪内部而可能导致枪的弹簧生锈
8.移液器在每次实验后应将刻度调至最大,让弹簧回复原型以延长移液器的使用寿命
9.为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层"液膜",造成排液量偏小而产生误差。
10..浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
11.移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体
12.不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度。同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液体,请使用移液管进行操作
移液器(移液器)使用建议:1、移液时保持正确的姿势;不要时
刻紧握移液器,使用带指钩的移液器帮助缓解手部疲劳;有可能的话经常换手操作。
2、定期检查移液器的密封状况,一旦发现密封老化或出现漏液,须及时更换密封圈。
3、每年对移液器进行1-2次检验(视使用频率而定)。
4、绝大多数移液器,在使用前和使用一段时间后,要给活塞涂上一层润滑油以保持密封性;
移液器的日常维护与维修移液器的清洁
定期清洗移液器,可以用肥皂水、60 %异丙醇、70%乙醇等非腐蚀性洗涤剂,再用蒸馏水清洗,自然晾干。高温消毒之前,要确保移液器能适应高温。
注意事项在吸取液体时不宜急速弹回,在吸取高粘度的液体时操作需更加如此,吸液前应检查管嘴内有无异物;新装的管嘴先吸入液体再排空,如此2-3次后再进行试验操作。移液器使用温度与校准相差很大的时候,移液器需另行校准。
1、前进法在洁净的试剂容器中注入待转移的溶液
A、将按钮压至第一停点位置
B、将移液器管嘴置于液面一下1cm深度并慢慢松开按钮,待管嘴吸入液体后,将管嘴撤出液面并协贴在试剂瓶壁上淌走多余的液体
C、轻轻压下操作按钮至第一停点,约1秒后继续将操作按钮向下压至此操作第二停点,此操作作用是排尽管嘴内的溶液
D、松开按扭使之返回起点位置
2、倒退法在洁净的试剂容器中注入待转移的溶液
A、将按钮压至第二停点位置
B、将移液器管嘴置于液面一下1cm深度并慢慢松开按钮,待管嘴吸入液体后,将管嘴撤出液面并协贴在试剂瓶壁上淌走多余的液体
C、轻轻压下操作按钮至第一停点,放出预设定的液体。将操作按钮保持在第一停点位置,使少量不包括移液量范围的液体依然留在管嘴内
D、剩余在管嘴内的液体随管嘴一起废弃或者移至原容器中。
外观要求
移液器塑料件外壳表而应平榷、光滑,不得有明显的缩痕、废边、裂纹、气泡和变形等现象;金属件表面镀层应无脱落、锈蚀和起层。
移液器主体应具有下列标记:产品名称、制造厂或商标、标称容量(ul或ml)、型号规格、出厂编号。
活塞
按动移液器的活塞时,上、下移动应灵活,分挡界限明显。
调节器
移液器的显示窗在容址调节动作时,应转动灵活,数字指示清晰、完整。
吸头
吸头应采用聚丙烯材料制成。
吸头不得有明显的弯曲现象。内壁应光洁、平滑,排液后不得有残留液体存在。
不同规格型号的移液器应采用相应配套的吸头。
检定介质
检定介质应符合GB 6682-1992《分析实验用水规格和试验方》要求的蒸馏水或去离子水,并提前24 h放人实验室内,使其温度与室温温差不得大于2度。
被检移液器应在检定前4h放入实验室内或等条件空间。
第五部分: 移液器的校准
采用衡量法对移液器进行检定。
1、检定前的准备
所选用的管嘴应与被检移液器的吸引杆配套。在移液器的吸引杆的下端,轻轻转动管嘴,以保证移液器的密封性,并在完成几次吸液、排液过程中应没有挂水现象。
多头型移液器的进行单孔分别检测
2、检定步骤
(1)将称量杯放人电子天平中,待天平显示稳定后,按下操纵杆使电子天平复零。
(2)将移液器的容量调到被检点。
(3)垂直握住移液器,将按钮按到第一档位,此时将管嘴浸入装有蒸馏水的容器内,并保持在液面下2mm到3mm处,缓慢放松按钮,等待1到3s后离开液面,擦干管嘴外的液体(此时不能碰到流液口,以免管嘴内的液体带出。)
(4)从电子天平中取出称量杯,将吸头流液口靠在称量杯内壁并成45°,缓慢的将按钮压到第一停止点,等待1到3秒,将按钮按到底部,然后将吸头沿着称量杯的内壁向上移开。
(5)将称量杯放入天平秤盘,记录此时天平显示出的数值,同时记录下此时容器内蒸馏水的温度。
(6)重复以上十次次以上,并填写《微量移液器校准表》
检定应包括两个量程,第一个为最大量程,第二个量程为最大量程的10%或最小量程
3,移液器容量小范围调整方法
容量不足的时用校准工具顺时针旋转螺母可增加容量
容量过大时用校准工具逆时针旋转螺母可减少容量