细胞计数板的计数误差范围通常在 ±10% 至 ±15% 左右。
影响细胞计数板计数误差的因素有很多,主要包括以下几个方面:
一、操作因素
加样不准确:加样量过多或过少都会影响计数的准确性。如果加样过多,细胞可能会重叠,难以准确计数;加样过少则可能导致计数结果偏低。
细胞分布不均匀:如果细胞悬液在计数板上分布不均匀,会使计数结果产生偏差。例如,在加样过程中产生气泡或细胞沉淀,都会导致局部细胞密度的变化。
计数方法不规范:对于压线细胞的计数规则不一致、漏计或重复计数等都会增加误差。
二、细胞特性因素
细胞大小和形态差异:不同类型的细胞大小和形态各异,这可能会影响在计数板上的观察和计数。例如,一些较小的细胞可能难以与杂质区分,而一些不规则形状的细胞可能在计数时容易产生歧义。
细胞活性:死细胞和活细胞在形态和染色特性上可能存在差异,这可能会干扰计数结果。此外,细胞的聚集或黏附也可能影响计数的准确性。
三、环境因素
温度和湿度:温度和湿度的变化可能会影响细胞悬液的稳定性和细胞的形态,从而影响计数结果。例如,在较高温度下,细胞可能会变形或破裂,而在较低湿度下,细胞悬液可能会蒸发,导致细胞密度的变化。
光照条件:在计数过程中,光照强度和角度的变化可能会影响细胞的观察和计数。过强或过弱的光照都可能使细胞难以分辨,从而增加计数误差。